| 查看: 3733 | 回复: 3 | ||||
| 本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
可溶性蛋白和包涵体
|
||||
| 有没有人能跟我说说诱导后的菌液加入上样缓冲液后煮沸，离心取上清跑电泳得到的是全蛋白（可溶性蛋白和包涵体），而用超声波破碎细胞的上清为什么就是可溶性蛋白了呢？不都是破碎了细胞吗？还有我们实验室只有超声波清洗仪，这个可以用来破碎细胞吗？我还看到有文献中说“渗透休克”，也就是将菌体先放在低渗溶液中，然后再放在高渗溶液中，然后离心取上清，那么上清中的蛋白是不是就是可溶性蛋白啊？比较迷糊，望高人指点！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有291人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 看到的一篇有关重组蛋白的纯化方法的文章，还有案例介绍说的！！
已经有2人回复
- 蛋白诱导
已经有6人回复
- 蛋白质的性质
已经有9人回复
- 包涵体蛋白做间接ELISA，显色不稳定，望做过的高手帮忙看一下，万分感激！！！
已经有2人回复
- MBP融合表达蛋白通过Amylose Resin之后纯化效率不佳
已经有15人回复
- 蛋白表达中实验组与对照的诱导表达无明显差异，求高人指点。
已经有2人回复
- 小木虫也建一个菌种库和质粒库吧
已经有11人回复
- 避免可溶性寡聚体的形成
已经有1人回复
- 原核表达IPTG诱导后样品处理
已经有2人回复
- bl21超声破壁问题
已经有4人回复
- 疏水性蛋白表达纯化问题
已经有2人回复
- 蛋白质纯化与鉴定实验指南[l冷泉港]中译本
已经有661人回复
- 蛋白表达
已经有1人回复
- 融合蛋白不挂柱，急！
已经有7人回复
- 【求助/交流】你知道这些蛋白表达的问题吗？
已经有3人回复
- 【转帖】关于细菌超声破碎的一些经验总结
已经有13人回复
- 【分享】蛋白质纯化个人总结2
已经有38人回复
- 【转帖】我国科学家发现帕金森氏病可能的发病机制
已经有2人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
山东征女友，坐标济南
+1/165
-
专业技术开发及第三方检测
+1/87
-
光学工程学硕调剂信息
+2/46
-
华南师范大学（211）博士招生- 电子、自动化、机械、生物学、物理相关专业
+2/42
-
1
+1/35
-
青岛大学泰山学者课题组招2026年申请考核制博士
+1/33
-
上海交通大学电催化方向博后招聘-有锂电、高分子、燃料电池背景者优先
+1/31
-
2026年工科硕士调剂-上海大学全国重点实验室团队-材料数据挖掘方向-研究生3-5人
+1/30
-
招硕士调剂生
+2/26
-
【预硕】【预博】青岛大学生物医药创新转化
+1/16
-
学术/专业硕士调剂——化学、资源与环境
+1/15
-
南开大学罗景山教授课题组招收2026年入学博士生（光/电催化方向）
+2/14
-
2026年西南科技大学功能涂层课题组简介
+1/11
-
上海科技大学招收有机化学方向招收2026级工程博士
+1/6
-
华中科技大学管理学院招聘社会用工（科研助理）1名
+1/6
-
上海第二工业大学-朱大海课题组招生（过线就能调剂）
+1/5
-
武汉纺织大学杰青团队招研究生（材料，化学，高分子，化工）
+1/4
-
“机械、材料”招生
+1/3
-
323分控制工程求调剂
+1/2
-
北京高校副校长团队招收机械类，环境类学硕和专硕
+1/2
★ ★ ★ ★ ★ ★
friya0910(金币+1):谢谢参与
friya0910(金币+2): 2011-08-26 11:50:38
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 解答很精彩 2011-08-26 17:27:23
friya0910(金币+1):谢谢参与
friya0910(金币+2): 2011-08-26 11:50:38
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 解答很精彩 2011-08-26 17:27:23
|
（1）包涵体是细胞里表达的不可溶的蛋白聚集体，只有通过变性剂才能溶解。 （2）超声破碎不涉及蛋白变性，所以包涵体仍然在沉淀中，上清只有可溶蛋白；而菌液加入上样缓冲液后煮沸，包括包涵体在内的所有蛋白都被变性溶解，也就是总蛋白。 （3）超声清洗仪不能用来超声破碎细胞——所谓的超声破碎，主是依靠超声探头产生的剪切力。 （4）“渗透休克”不能够让不可溶蛋白重新溶解，所以上清得到的只是可溶蛋白。另外虽然我没做过渗透休克，但从原理上来看，破碎效率应该不会很好——比如可能和溶菌酶效果接近。 所以建议楼主还是申请买一个超声破碎仪吧，国产的也不贵，买的时候注意咨询商家关于探头的信息。 |
4楼2011-08-26 08:55:16
2楼2011-08-25 15:13:11
3楼2011-08-25 18:28:26
