应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 可溶性蛋白和包涵体
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
41/1返回列表
查看: 3763  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看

friya0910

新虫 (正式写手)

[交流] 可溶性蛋白和包涵体

有没有人能跟我说说诱导后的菌液加入上样缓冲液后煮沸，离心取上清跑电泳得到的是全蛋白（可溶性蛋白和包涵体），而用超声波破碎细胞的上清为什么就是可溶性蛋白了呢？不都是破碎了细胞吗？还有我们实验室只有超声波清洗仪，这个可以用来破碎细胞吗？我还看到有文献中说“渗透休克”，也就是将菌体先放在低渗溶液中，然后再放在高渗溶液中，然后离心取上清，那么上清中的蛋白是不是就是可溶性蛋白啊？比较迷糊，望高人指点！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-08-25 14:45:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xbl3688

银虫 (正式写手)
★ ★
friya0910(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+1): 鼓励下 2011-08-25 17:24:48
清洗用的超声破碎仪应该也可以做细胞破碎，不过一些参数（比如 探头的振幅、间歇时间等）要按不同用途设置好。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-08-25 15:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jtliuok

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
friya0910(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 学习了！ 2011-08-25 18:39:45
friya0910(金币+5): 2011-08-26 11:50:32
因为超声破碎离心之后包涵体在沉淀中，可溶性蛋白在上清中。而直接吸取菌液煮沸后包涵体会破裂，与可溶性蛋白一起在上清中
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2011-08-25 18:28:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imfly77

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
friya0910(金币+1):谢谢参与
friya0910(金币+2): 2011-08-26 11:50:38
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 解答很精彩 2011-08-26 17:27:23
（1）包涵体是细胞里表达的不可溶的蛋白聚集体，只有通过变性剂才能溶解。
（2）超声破碎不涉及蛋白变性，所以包涵体仍然在沉淀中，上清只有可溶蛋白；而菌液加入上样缓冲液后煮沸，包括包涵体在内的所有蛋白都被变性溶解，也就是总蛋白。
（3）超声清洗仪不能用来超声破碎细胞——所谓的超声破碎，主是依靠超声探头产生的剪切力。
（4）“渗透休克”不能够让不可溶蛋白重新溶解，所以上清得到的只是可溶蛋白。另外虽然我没做过渗透休克，但从原理上来看，破碎效率应该不会很好——比如可能和溶菌酶效果接近。

所以建议楼主还是申请买一个超声破碎仪吧，国产的也不贵，买的时候注意咨询商家关于探头的信息。
赞一下(5人) 回复此楼
4楼2011-08-26 08:55:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 friya0910 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿211，0703化学305分求调剂 +13 严西西戏 2026-04-06 15/750 2026-04-08 00:38 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +12 墨墨漠 2026-04-06 12/600 2026-04-08 00:29 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +16 不逢春 2026-04-07 17/850 2026-04-08 00:22 by T可可西里T
[考研] 复试调剂 +9 春日来信- 2026-04-03 9/450 2026-04-07 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 26自然地理学303分求调剂 +4 一战成硕啊啊啊� 2026-04-06 9/450 2026-04-06 20:35 by lin-da
[考研] 材料调剂 +5 小刘同学吖吖 2026-04-06 5/250 2026-04-06 18:34 by sherry_1901
[考研] 269电子信息求调剂，可转专业 +5 独酌wl 2026-04-06 5/250 2026-04-06 17:23 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿武汉理工大学-085601材料工程（专硕）-总分353求调剂 +3 2626262626li 2026-04-02 3/150 2026-04-06 09:08 by 无际的草原
[考研] 302分 085601求调剂推荐 +11 zyx上岸！ 2026-04-05 11/550 2026-04-05 22:13 by dongzh2009
[考研] 296求调剂 +3 汪！？！ 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:13 by 啵啵啵0119
[考研] 电子信息调剂交叉学科有推荐吗 +6 jhtfeybgj 2026-04-01 9/450 2026-04-05 11:13 by 猪会飞
[考博] 申博 +7 IQwQl 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:32 by mumin1990
[考研] 272求调剂 +4 松柏常青5 2026-04-03 4/200 2026-04-04 17:03 by babysonlkd
[考研] 282求调剂 +20 ycy1201 2026-04-01 22/1100 2026-04-04 00:42 by userper
[考研] 求调剂，一志愿北京中医药大学 +3 小小达不溜 2026-04-02 3/150 2026-04-03 22:55 by 冲矢昴星团
[考研] 311求调剂 +11 勇敢的小吴 2026-04-02 11/550 2026-04-03 21:46 by qlm5820
[考研] 调剂 +5 asdasdassda 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:27 by 岸上的一条鱼
[考研] 考研调剂 +3 Draa 2026-04-03 3/150 2026-04-03 17:37 by hgwz7468
[考研] 316求调剂 +14 舟自梗 2026-04-01 18/900 2026-04-03 10:28 by linyelide
[考研] 一志愿安徽大学计算机科学与技术学硕，331分求调剂 +5 蒋昌鹏qtj 2026-04-01 5/250 2026-04-02 08:10 by fxue1114
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭