24小时热门版块排行榜    

查看: 1677  |  回复: 8

nininini

银虫 (小有名气)

[求助] 关于RNA反转定量

我的RNA样品有些降解,由电泳及分光光度计两种方法计量RNA浓度,那么在反转时是应该以OD260计算呢,还是以电泳图谱分析的23s、16s条带的亮度来定量呢?两者计算结果能差十几倍呢,请高手指点。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
nininini(金币+2): 2011-08-23 14:50:46
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利! 2011-08-23 17:06:45
以电泳图谱分析的23s、16s条带的亮度来定量即可,而且电泳图可以很直观的反应RNA模板的完整性。
2楼2011-08-23 14:19:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢交流, 2011-08-23 18:18:26
nininini(金币+2): 2011-08-23 19:42:05
个人看的文献一般都为OD260定量,通过图谱和OD比值来判断质量。
楼主可以根据你的目标杂志来做依据。
3楼2011-08-23 17:06:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by adslye at 2011-08-23 17:06:14:
个人看的文献一般都为OD260定量,通过图谱和OD比值来判断质量。
楼主可以根据你的目标杂志来做依据。

你好,我的OD比值在接受的范围内,不明白你所说的目标杂质是什么意思,能具体点儿吗?
4楼2011-08-23 19:43:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

nininini(金币+2): 2011-08-25 09:12:31
引用回帖:
4楼: Originally posted by nininini at 2011-08-23 19:43:06:
你好,我的OD比值在接受的范围内,不明白你所说的目标杂质是什么意思,能具体点儿吗?

打错字。。。杂志~~~
您要投得杂志里面,文章一般用哪种定量。可能方便你后期投递。
5楼2011-08-24 07:30:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


lstt09nk(金币+1): 感谢参与 2011-08-24 13:06:42
nininini(金币+2): 2011-08-25 09:12:49
我看到的文章一般都是采用OD值来定量的,采用电泳图谱来确定RNA 的完整性的。
风雪夜归人
6楼2011-08-24 08:32:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nininini

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by adslye at 2011-08-24 07:30:07:
打错字。。。杂志~~~
您要投得杂志里面,文章一般用哪种定量。可能方便你后期投递。

有用,谢谢~~
但是我的图如上,这两中定量方法结果差距太大了,在反转中肯定有很大问题的吧
7楼2011-08-25 09:13:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

nininini(金币+2): 2011-08-25 16:13:28
引用回帖:
7楼: Originally posted by nininini at 2011-08-25 09:13:57:
有用,谢谢~~
但是我的图如上,这两中定量方法结果差距太大了,在反转中肯定有很大问题的吧

在RNA干净的情况下肯定是测紫外更准。因为直接测的RNA的吸收。
凝胶可以想象成二手数据。首先要结合EB,其次跑胶过程中微观不可预知问题,
最后紫外激发EB发光,然后电脑拍照片。再将照片中的亮度通过数学模型转化为数值。
显然这种方法影响因素要多。
8楼2011-08-25 10:47:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rb

木虫 (著名写手)

小笨虫虫

【答案】应助回帖

23s:16S如果<1的样本尽量不要用。在此基础上用OD值
寝室楼的大爷、大妈都是哲学家,他们每天都在思考人类最根本的三个问题:你是谁?你从哪儿来?要去哪儿?
9楼2011-08-25 12:29:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nininini 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +5 生物工程调剂 2026-03-17 9/450 2026-03-21 23:32 by zhujy1982
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂 +4 上岸6666@ 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:14 by 学员8dgXkO
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 306求调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-18 4/200 2026-03-21 08:25 by laoshidan
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +6 梨花珞晚风 2026-03-17 6/300 2026-03-21 03:40 by JourneyLucky
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 Ma_xt 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:05 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +10 冷笙123 2026-03-17 10/500 2026-03-21 01:54 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 319求调剂 +3 小力气珂珂 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:47 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
信息提示
请填处理意见