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5--6KB的基因片段多长时间扩增?用什么样的酶好呢?
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nnsulei
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[交流]
5--6KB的基因片段多长时间扩增?用什么样的酶好呢?
已有13人参与
5--6KB的基因片段多长时间扩增?用什么样的酶好呢?
LA Taq可以吗?要多长时间呢。图个便宜呗哈哈~~~
谢谢各位,问题解决了!片段太长,以基因组为模板总是弥散带,干脆最后就分段P了。呵呵
[
Last edited by nnsulei on 2011-8-22 at 14:08
]
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努力做就有结果~
1楼
2011-08-19 11:11:03
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西瓜(金币+2): 有道理啊 2011-08-19 18:44:26
这么长的片段不太好扩,即使扩出来也未必会全部正确;所以建议你分段扩,各段都正确后再拼接
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
5楼
2011-08-19 14:28:50
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dhd997(金币+2): good 2011-08-19 12:01:58
一般来说普通Taq酶扩增速度是每分钟1kb,高保真Taq酶是每分钟750个碱基左右
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山水凤凰
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2011-08-19 11:31:15
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1949stone(金币+3): 可以考虑 2011-08-19 13:19:11
Taq plus 吧。。。是taq酶和PFU酶的混合物,保真性比较高一点。
扩增那么长的话,延伸时间5min吧。。。。
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4楼
2011-08-19 12:15:02
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zgb1982
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西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-08-19 18:44:35
建议分段扩,再拼接虽然觉得麻烦,但说不定会更省时间
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7楼
2011-08-19 15:24:59
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