应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 5--6KB的基因片段多长时间扩增？用什么样的酶好呢？
161/2返回列表12下一页
查看: 3367  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nnsulei

金虫 (正式写手)

[交流] 5--6KB的基因片段多长时间扩增？用什么样的酶好呢？ 已有13人参与

5--6KB的基因片段多长时间扩增？用什么样的酶好呢？
LA Taq可以吗?要多长时间呢。图个便宜呗哈哈～～～
谢谢各位，问题解决了！片段太长，以基因组为模板总是弥散带，干脆最后就分段P了。呵呵

[ Last edited by nnsulei on 2011-8-22 at 14:08 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
努力做就有结果～
1楼 2011-08-19 11:11:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liukgg

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): good 2011-08-19 12:01:58
一般来说普通Taq酶扩增速度是每分钟1kb，高保真Taq酶是每分钟750个碱基左右
赞一下(2人) 回复此楼
山水凤凰
2楼2011-08-19 11:31:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w2boluo

金虫 (小有名气)
kod-plus,3min
回复此楼
How about the future？
3楼2011-08-19 11:34:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+3): 可以考虑 2011-08-19 13:19:11
Taq plus 吧。。。是taq酶和PFU酶的混合物，保真性比较高一点。
扩增那么长的话，延伸时间5min吧。。。。
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-08-19 12:15:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+2): 有道理啊 2011-08-19 18:44:26
这么长的片段不太好扩，即使扩出来也未必会全部正确；所以建议你分段扩，各段都正确后再拼接
赞一下(2人) 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
5楼2011-08-19 14:28:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shizishanshang

至尊木虫 (职业作家)
LA TAQ ，5min
回复此楼
6楼2011-08-19 15:01:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgb1982

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-08-19 18:44:35
建议分段扩，再拼接虽然觉得麻烦，但说不定会更省时间
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2011-08-19 15:24:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xbl3688

银虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+3): Good 2011-08-20 22:24:52
至于酶和延伸时间推荐四楼的，这么长片段扩的话出现突变的几率是要大一点，几个人回复中推荐说要分段扩，那么能不能培养含有这个片段的原载体的菌，然后抽质粒。从抽到的质粒上酶切得到产物，也可以保证碱基序列的准确性呀。
赞一下(2人) 回复此楼
生活的乐趣在于善于发现美，学会欣赏美
8楼2011-08-20 13:24:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 鼓励分享经验 2011-08-20 22:25:50
NEB公司的Phusion超保真酶,2kb/m,曾经扩过5kb的片段，一个碱基都没错。
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2011-08-20 15:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nnsulei

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xbl3688 at 2011-08-20 13:24:26:
至于酶和延伸时间推荐四楼的，这么长片段扩的话出现突变的几率是要大一点，几个人回复中推荐说要分段扩，那么能不能培养含有这个片段的原载体的菌，然后抽质粒。从抽到的质粒上酶切得到产物，也可以保证碱基序列的 ...

是从基因组DNA中扩增。
赞一下 回复此楼
努力做就有结果～
10楼2011-08-20 16:01:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nnsulei 的主题更新
161/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科郑州大学物理学院，一志愿华科070200学硕，346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +9 llllkkkhh 2026-03-18 9/450 2026-03-19 07:40 by BruceLiu320
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 材料专业求调剂 +5 hanamiko 2026-03-18 5/250 2026-03-18 20:19 by 星空星月
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-13 6/300 2026-03-18 14:14 by 脱颖而出
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧， 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。，。，。，。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭