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hnndpt

铁虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 19.3
散金: 38
红花: 1
帖子: 446
在线: 179.7小时
虫号: 503311
注册: 2008-02-15
性别: GG
专业: 植物遗传学

[求助] 反向PCR求助！

最近在做反向PCR, 酶切后取8微升，用400微升体系连接。但连接完毕沉淀，离心后没有发现任何东西？请问是什么原因造成的？
1.我用的内切酶为 Hae111, 识别4个碱基，平末端；；
2.另外用了 PVUII, MSP1， Mbol
3.我的目的基因中没有合适的酶切位点，请问可以选用一些基因中没有的酶切位点吗？

此外求助大家做反向PCR的体系，非常感谢！！！

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1楼2011-08-15 20:30:54

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wyue-8461

铜虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 674.3
帖子: 8
在线: 19.1小时
虫号: 320434
注册: 2007-03-10
专业: 环境微生物学

一系列步骤下来是不是DNA浓度太低了？

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14楼2011-10-31 19:02:49

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