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笨猫407

金虫 (小有名气)


[交流] Folin-酚法测酶活~有木有!有木有!

有谁用过Folin-酚法测酶活的呀?
是不是要求待测定的酶蛋白很纯,才能定量的测定,如果没有进行分离纯化,是不是就不能进行测定啊?
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)


★ ★ ★ ★
笨猫407(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-08-06 19:32:46
笨猫407(金币+1): 2011-08-16 15:32:56
引用回帖:
1楼: Originally posted by 笨猫407 at 2011-08-06 10:06:24:
有谁用过Folin-酚法测酶活的呀?
是不是要求待测定的酶蛋白很纯,才能定量的测定,如果没有进行分离纯化,是不是就不能进行测定啊?

不是的,Folin-酚法是一种常见的蛋白酶酶活测定方法,不一定非要纯的蛋白酶,蛋白酶粗提物也可以用Folin-酚法检测酶活的。酶活力可以用底物的降解速度来进行定量。但是如果蛋白酶粗提物是通过盐析等方法提取的话,过高的盐离子浓度会影响酶的催化活性,检测之前最好通过透析处理,把盐离子和其他小分子杂质先除去。
如果酶没有纯化的话,计算酶的比活力会受到影响,如果粗提物中存在其他蛋白的话,总蛋白的含量测定值会偏高,从而计算出来的蛋白酶的比活力会偏小。
2楼2011-08-06 11:41:27
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qqaoqq3楼
2011-08-29 17:40   回复  
笨猫407(金币+1):谢谢参与
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