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笨猫407

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[交流] Folin-酚法测酶活~有木有！有木有！

有谁用过Folin-酚法测酶活的呀？
是不是要求待测定的酶蛋白很纯，才能定量的测定，如果没有进行分离纯化，是不是就不能进行测定啊？

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1楼 2011-08-06 10:06:24

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jinkui960

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笨猫407(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-08-06 19:32:46
笨猫407(金币+1): 2011-08-16 15:32:56

引用回帖:

1楼: Originally posted by 笨猫407 at 2011-08-06 10:06:24:
有谁用过Folin-酚法测酶活的呀？
是不是要求待测定的酶蛋白很纯，才能定量的测定，如果没有进行分离纯化，是不是就不能进行测定啊？

不是的，Folin-酚法是一种常见的蛋白酶酶活测定方法，不一定非要纯的蛋白酶，蛋白酶粗提物也可以用Folin-酚法检测酶活的。酶活力可以用底物的降解速度来进行定量。但是如果蛋白酶粗提物是通过盐析等方法提取的话，过高的盐离子浓度会影响酶的催化活性，检测之前最好通过透析处理，把盐离子和其他小分子杂质先除去。
如果酶没有纯化的话，计算酶的比活力会受到影响，如果粗提物中存在其他蛋白的话，总蛋白的含量测定值会偏高，从而计算出来的蛋白酶的比活力会偏小。