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xiaopeiliang金虫 (小有名气)
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GS115同源重组的问题
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用pPIC9K作为载体，转化GS115的时候会发生同源双交换，如果能发生双交换，重组的是只有自己的目的基因呢，还是会附带质粒上的一段序列？还有就是重组到GS115之后，会插入到5和3AOX1基因的中间，那这两个基因在基因组哪条染色体的什么位置呢？实在是想知道，在甲醇诱导的时候，它的ORF是什么，到底表达的时候是通过什么样的信号肽释放到胞外的！希望有大神指点一二。 还有就是，看很多目的基因都是直接克隆到的mat-petide的基因，并不含有起始密码子，那再表达的过程中，是借助什么位置的起始密码子正确的表达出想要的蛋白的呢? [ Last edited by 1949stone on 2011-8-3 at 17:44 ] |
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 【分子生物】EPI帖 |
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lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
1949stone(MolEPI+1): 鼓励 学习下 2011-08-03 17:44:42
xiaopeiliang(金币+3): 3Q 2011-08-05 14:47:59
xiaopeiliang(金币+3): 3Q 2011-08-05 14:47:59
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你说的这些问题好好看看invitrogen公司的酵母表达手册就知道了。如果能发生双交换，重组的除了目的基因呢还会附带质粒上的一段序列的。ORF是从949位置的ATG开始的，前面一段是a-Factor Signal Sequence，也就是信号肽序列。 http://tools.invitrogen.com/content/sfs/manuals/ppic9k_man.pdf http://tools.invitrogen.com/content/sfs/vectors/ppic9k_mcs.pdf |
3楼2011-08-03 17:42:45
xiaopeiliang
金虫 (小有名气)
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2楼2011-08-03 14:44:59
