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SDS-PAGE电泳问题
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wb20081
木虫
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[交流]
SDS-PAGE电泳问题
刚开始做SDS-PAGE电泳,但是出现一些问题,希望各位高手出手相助。我用100V电压跑堆积胶,之后改为150V跑分离胶,8个孔全点满,条带向两边跑偏,并且越往下条带越宽,marker点中间,但是下部条带颜色弥散不清,颜色越跑越浅,不知道是何原因。
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2011-08-03 13:28:42
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cool-cj
铁杆木虫
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖
wb20081(金币+1): 谢谢 2011-08-11 09:08:11
制胶的时候没混匀,制出来的胶就不均匀,加分离胶的时候尽量快点
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7楼
2011-08-06 08:51:35
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KinnerHuang
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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-08-04 13:21:13
wb20081(金币+1): 好的,谢谢,我再试试 2011-08-05 10:09:34
会不会是电压有点高啊 80、100足够了 你再试试
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2楼
2011-08-04 10:21:59
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晴天1882
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★
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wb20081(金币+1): 可能是的,也可能是我点样比较慢的原因,谢谢。 2011-08-11 08:59:59
感觉像是胶没配好或是灌好,样品在胶里扩散的比较严重,所以容易跑偏,由于扩散了越到下面颜色就越浅了。
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3楼
2011-08-05 18:24:03
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btx362237729
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dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-08-07 15:43:27
wb20081(金币+1): AP和TEMED是最后加的,我发现如果所有的孔都点反而会偏,只点中间的空就很直,不知为什么。呵呵 2011-08-11 09:02:00
你的胶没混匀,上样之前混匀一下,还有就是AP和TEMED要最后加
还有就是不上样的孔要用loadin buffer补齐
电压有点高,浓缩胶用65 分离胶用90试试
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4楼
2011-08-05 19:39:43
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