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wb20081

木虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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[交流] SDS-PAGE电泳问题

刚开始做SDS-PAGE电泳，但是出现一些问题，希望各位高手出手相助。我用100V电压跑堆积胶，之后改为150V跑分离胶，8个孔全点满，条带向两边跑偏，并且越往下条带越宽，marker点中间，但是下部条带颜色弥散不清，颜色越跑越浅，不知道是何原因。

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1楼 2011-08-03 13:28:42

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晴天1882

木虫 (正式写手)

应助: 19 (小学生)
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虫号: 744363

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wb20081(金币+1): 可能是的，也可能是我点样比较慢的原因，谢谢。 2011-08-11 08:59:59

感觉像是胶没配好或是灌好，样品在胶里扩散的比较严重，所以容易跑偏，由于扩散了越到下面颜色就越浅了。

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3楼2011-08-05 18:24:03

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KinnerHuang

新虫 (初入文坛)

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虫号: 1311831

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-08-04 13:21:13
wb20081(金币+1): 好的，谢谢，我再试试 2011-08-05 10:09:34

会不会是电压有点高啊 80、100足够了你再试试

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2楼2011-08-04 10:21:59

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btx362237729

金虫 (正式写手)

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虫号: 1069351

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-08-07 15:43:27
wb20081(金币+1): AP和TEMED是最后加的，我发现如果所有的孔都点反而会偏，只点中间的空就很直，不知为什么。呵呵 2011-08-11 09:02:00

你的胶没混匀，上样之前混匀一下，还有就是AP和TEMED要最后加
还有就是不上样的孔要用loadin buffer补齐
电压有点高，浓缩胶用65 分离胶用90试试