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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE电泳问题
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wb20081

木虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE电泳问题

刚开始做SDS-PAGE电泳，但是出现一些问题，希望各位高手出手相助。我用100V电压跑堆积胶，之后改为150V跑分离胶，8个孔全点满，条带向两边跑偏，并且越往下条带越宽，marker点中间，但是下部条带颜色弥散不清，颜色越跑越浅，不知道是何原因。
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1楼 2011-08-03 13:28:42
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KinnerHuang

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-08-04 13:21:13
wb20081(金币+1): 好的，谢谢，我再试试 2011-08-05 10:09:34
会不会是电压有点高啊 80、100足够了 你再试试
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2楼2011-08-04 10:21:59
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晴天1882

木虫 (正式写手)
★
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wb20081(金币+1): 可能是的，也可能是我点样比较慢的原因，谢谢。 2011-08-11 08:59:59
感觉像是胶没配好或是灌好，样品在胶里扩散的比较严重，所以容易跑偏，由于扩散了越到下面颜色就越浅了。
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3楼2011-08-05 18:24:03
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btx362237729

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+3): 鼓励交流 2011-08-07 15:43:27
wb20081(金币+1): AP和TEMED是最后加的，我发现如果所有的孔都点反而会偏，只点中间的空就很直，不知为什么。呵呵 2011-08-11 09:02:00
你的胶没混匀，上样之前混匀一下，还有就是AP和TEMED要最后加
还有就是不上样的孔要用loadin buffer补齐
电压有点高，浓缩胶用65 分离胶用90试试
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4楼2011-08-05 19:39:43
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lemonilove

银虫 (小有名气)
★
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wb20081(金币+1): 谢谢 2011-08-11 09:02:31
你的胶可能没混匀，加一个溶剂混一次

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2011-08-05 23:25:44
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关菲菲

铜虫 (小有名气)
★
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wb20081(金币+1): 谢谢 2011-08-11 09:03:19
我原来跑的电压是用80 160，可能是胶没混匀
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6楼2011-08-06 07:53:19
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cool-cj

铁杆木虫 (正式写手)
★
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wb20081(金币+1): 谢谢 2011-08-11 09:08:11
制胶的时候没混匀，制出来的胶就不均匀，加分离胶的时候尽量快点
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7楼2011-08-06 08:51:35
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