24小时热门版块排行榜

返回列表

本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

duckcat

银虫 (初入文坛)

MolEPI: 3
应助: 0 (幼儿园)
金币: 258.1
帖子: 17
在线: 16.9小时
虫号: 847628
注册: 2009-09-14

【答案】应助回帖

rainontime(金币+1): 不错的 2011-08-01 18:10:16
1949stone(MolEPI+1): 不错不错 2011-08-01 20:31:33

这是很正常的，一般酶切后的目的片段往往比pcr扩增得到的跑胶拖后，主要有以下几个物理因素造成：
1，因为载体属于比较大的分子了，质粒如果浓度较高的话，难免分子间的作用力较强，因为这种力的存在导致了目的片段跑胶速度较慢！
2, 可能切得时间比较长，导致许多分子杂质增多！
3，如果很靠后的话极有可能你的凝胶浓度不均匀……

暂时想到这么多！

赞一下(1人)

回复此楼

2楼2011-08-01 17:23:48

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

点击这里搜索更多相关资源

科研从小木虫开始，人人为我，我为人人

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

专家经验: +57
MolEPI: 106
应助: 95 (初中生)
贵宾: 0.263
金币: 16382.3
散金: 593
红花: 74
沙发: 9
帖子: 3648
在线: 288.2小时
虫号: 441757
注册: 2007-10-27
专业: 微生物生理与生物化学
管辖: 微生物

【答案】应助回帖

1949stone(MolEPI+1): 来也 2011-08-01 20:32:03

1：连接体系不知道你选择的合适不，涂布了那么多板子怎么就长了一个单克隆，个人觉得你先从连接体系上着手，提高了连接的效率才能保证你做一次连接的成功率啊，你说是不？连接体系你先得定量看看你的载体和目的基因的量，如果量差不多的话，目的基因多加一些；当然了你要确定你的载体和基因酶切完全了；
2：至于验证嘛，很简单的，先把长出来的单克隆划到相同抗性的板子上，然后做一个PCR初步验证看看，如果能够P出来大小相同的一条带那很有可能就对了，然后再提取质粒进行酶切验证就OK了。

赞一下(1人)

回复此楼

Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!

5楼2011-08-01 19:59:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 rainontime 的主题更新

返回列表