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friya0910

新虫 (正式写手)

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[求助] 表达载体构建的相关问题

现在要构建表达载体，有一些问题不是很明确，希望懂得的不吝赐教啊！
首先是双酶切表达载体和带有目的片段的T载体，一般都切多少时间啊？我看有说切过夜的，也有切几个小时的！切完以后大家都从哪些方面确定酶切完全不完全呢？
其次是连接以后除了直接转化以外，还有什么方法确定是否连接上了呢？
本人新手一个，对于这方面不是很了解，希望各位帮帮忙！

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1楼 2011-07-18 15:05:41

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千king寻

铜虫 (初入文坛)

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专业: 农业昆虫学

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励反馈哦 2011-07-21 11:23:33

　金属浴：采用微电脑控制和半导体制冷技术制造的一款恒温金属浴产品，仪器可配置多种模块，可广泛应用于样品的保存、各种酶的保存和反应、核酸和蛋白质的变性处理、PCR 反应、电泳的预变性和血清凝固等。
性能特点：
★微电脑数显控制温度.
★采用先进的热电膜加热技术.
★同时显示设置温度和即时温度.
★采用金属模块，可使样品免受污染.
★金属模块可方便更换，便于清洁、消毒和适用各种试管.
★内置超温保护装置，使用更可靠.
★温度偏差校准。
这是在说明书上写的，具体的我也不是太清楚，我们实验室在进行目的基因连接到载体上时都是在金属浴16度过夜连接的。