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blueghost006

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何进一步纯化这个蛋白?

最近在纯化一个蛋白~~但是总是会有杂带啊~~~~不知道有什么方法可以将那些讨厌的杂带给弄掉~~~~另外,我纯化出来去打抗体的~~~不知道就以这样的水平可以打么?PS:最亮的是我的目的条带~~~~
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blueghost006

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by zhougama at 2011-07-16 15:00:04:
你总得简单介绍下你的纯化方法以及你这种蛋白质的某些性质吧,不然我们如何知道!

我的那个蛋白是一个全蛋白的N端,与Trx融合,PET32作为载体,在BL21中表达,然后过Ni柱,先用6M~1M的尿素复性,然后用咪唑洗脱,先用20mM的PH=7.5的咪唑洗脱,再用20mM/PH=6.0咪唑洗脱,最后用500mM/PH=8.0的咪唑洗下目的蛋白,不知道各位大虾有什么意见?
4楼2011-07-17 13:27:39
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zhougama

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

2楼2011-07-16 15:00:04
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以利用TAP技术进行蛋白纯化,你搜下网上很多介绍的
3楼2011-07-16 15:52:36
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zhougama

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2011-07-17 16:33:55
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