应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】这样的情况应该如何选择进一步的纯化步骤？
51/1返回列表
查看: 701  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手

[交流] 【求助/交流】这样的情况应该如何选择进一步的纯化步骤？ 已有3人参与

如附件中图所示：最右边的带为目的蛋白，HIS-TAG利用镍柱纯化，感觉目的蛋白下还有一条颜色比较浅的带。对于这种情况是否有必要进一步纯化？可以考虑采用何种纯化方法呢？请各位指教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-01-13 14:08:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):good 2011-01-13 15:08:46
都利用HIS-TAG镍柱纯化了，还继续纯化也没多大意义了。
镍柱纯化时用低浓度咪唑预洗杂质，然后高浓度咪唑洗目的蛋白看看。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-01-13 14:13:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-01-13 14:13:44:
都利用HIS-TAG镍柱纯化了，还继续纯化也没多大意义了。
镍柱纯化时用低浓度咪唑预洗杂质，然后高浓度咪唑洗目的蛋白看看。

那么针对这个情况，又没有可能是电泳本身的原因导致一种蛋白出现两条带呢？还是肯定是杂蛋白？我之前用过40%的咪唑洗，确实洗掉了很多杂蛋白，再用60%的洗脱目的蛋白，跑电泳用的是60%洗脱的蛋白样品
赞一下 回复此楼
3楼2011-01-13 14:23:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zh1987hs at 2011-01-13 14:23:35:

那么针对这个情况，又没有可能是电泳本身的原因导致一种蛋白出现两条带呢？还是肯定是杂蛋白？我之前用过40%的咪唑洗，确实洗掉了很多杂蛋白，再用60%的洗脱目的蛋白，跑电泳用的是60%洗脱的蛋白样品

也可能是电泳本身的问题或者蛋白降解等。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-01-13 15:08:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):good 2011-01-13 15:14:47
切标签，反穿。

不过好像是你的胶跑得不好，都有重影呢？
赞一下(2人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2011-01-13 15:10:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zh1987hs 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-09 6/300 2026-03-14 02:14 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学，英一数二305分求调剂，四六级已过 +8 小小番的茄 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:53 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:06 by 星空星月
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 【0856】化学工程（085602）313 分，本科学科评估A类院校化学工程与工艺，诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:06 by ruiyingmiao
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
[考研] 一志愿华中师范071000，325求调剂 +5 RuitingC 2026-03-12 5/250 2026-03-13 10:43 by hyswxzs
[考研] 341求调剂 +4 捣蛋猪猪 2026-03-11 4/200 2026-03-12 14:47 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考研] 一志愿：武汉理工，材料工程，英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
[硕博家园] 木虫好像不热闹了，是不是？ +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭