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用于表达的重组载体构建后需要测序吗?
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friya0910
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用于表达的重组载体构建后需要测序吗?
已有4人参与
做蛋白的体外表达,构建完重组质粒之后需要测序确定重组质粒构建是否正确吗?还是就双酶切和PCR验证就可以啊?个人觉得测序要保险一点,但是看别人好像都不测序的说。
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1楼
2011-07-05 19:25:29
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friya0910
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Originally posted by
gwbk
at 2011-07-05 21:22:47:
去测一下吧,我郁闷就在这呢。TA克隆完全正确,双酶切换载体后竟然有点突变不说,还有2个连续的碱基缺失突变。难以承受的打击!
恩,保险起见还是测一下吧!
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5楼
2011-07-05 21:25:03
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冼亮淀粉酶
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):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-07-05 20:04:06
可以不测序,因为你在TA克隆的时候已经测序验证过了,再连上表达载体的时候只要验证有你的外源片段就行了。如果你担心在连接表达载体的时候出错,那你就最好再测序一次吧。你的这个帖我也回了,你考虑一下我的建议。
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3369012&pid=1971104&page=1#pid1971104
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流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼
2011-07-05 19:47:28
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friya0910
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引用回帖:
Originally posted by
冼亮淀粉酶
at 2011-07-05 19:47:28:
可以不测序,因为你在TA克隆的时候已经测序验证过了,再连上表达载体的时候只要验证有你的外源片段就行了。如果你担心在连接表达载体的时候出错,那你就最好再测序一次吧。你的这个帖我也回了,你考虑一下我的建议 ...
谢谢您的指点啊!真是受益匪浅呢!
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3楼
2011-07-05 19:57:53
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gwbk
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-06 07:41:15
去测一下吧,我郁闷就在这呢。TA克隆完全正确,双酶切换载体后竟然有点突变不说,还有2个连续的碱基缺失突变。难以承受的打击!
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4楼
2011-07-05 21:22:47
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