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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

[交流] 镍柱纯化蛋白透析出现大量沉淀,请教 已有14人参与

昨晚镍柱纯化两个蛋白(脂肪酶),上样量为20ml镍柱纯化1L菌液破碎上清(80ml),最后用50ml  500mM咪唑(50mM Tris·Hcl,0.5mM Nacl,10%甘油  )洗脱,透析:(1)50mM Tris·Hcl,0.2mM Nacl  3L 透析3h,开始出现沉淀;(2)50mM Tris·Hcl,0.03mM Nacl,3L透析不到1h,就出现比较多的沉淀了,7h后出现大量沉淀。透析一直在4℃下搅拌进行。请教各位高手,是我蛋白变性太快了还是透析过程中什么因素引起的,谢谢
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
看天(金币+2): 鼓励回答 2011-06-30 15:59:03
很怪异,500mM那么高的咪唑洗脱,只洗了2.5倍柱床体积。0.03mM Nacl那么低,我怀疑是30mM。不过可能楼主的实验就是要求这样的。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2011-06-30 15:01:07
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-07-05 12:18:35
脱盐很快的,而且容积变化不大,最多为原来的三倍,我做的时候是1.5倍。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
10楼2011-07-04 16:57:41
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