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qwky2010

金虫 (著名写手)


[交流] 大片段连接求经验

rt,大家好,我连接的片段3k,载体9K左右吧,这样有什么要注意的吗,还是按照通常连接那样呢,先谢谢了
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gumingzhu

金虫 (正式写手)



qwky2010(金币+1):谢谢参与
qwky2010(金币+2): 谢谢啊 2011-06-29 15:57:12
我的载体是9kb,连了4kb进去,就正常连的,连上了,就是涂板后就长了几个,还好验证是正确的
2楼2011-06-29 11:57:13
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★ ★
qwky2010(金币+1):谢谢参与
qwky2010(金币+2): 谢谢啊 2011-06-29 15:57:26
西瓜(金币+1): 高手啊 2011-06-29 16:49:45
按照正常连接就可以了,不过连接体系,时间各种都得把握好,我原来将3.6kb的片段连接至一4.7的载体,一次OK。。。

祝你好运!

[ Last edited by 天使托 on 2011-6-29 at 12:08 ]
3楼2011-06-29 12:06:09
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zyly605

银虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
qwky2010(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-29 16:49:36
在PCR目的片段的时候应该用高保真酶,然后根据片段浓度和载体浓度计算连接体系,然后就照常连接就可以了
4楼2011-06-29 15:22:03
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