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qwky2010

金虫 (著名写手)

[交流] 大片段连接求经验

rt,大家好，我连接的片段3k，载体9K左右吧，这样有什么要注意的吗，还是按照通常连接那样呢，先谢谢了
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1楼 2011-06-29 11:46:19
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gumingzhu

金虫 (正式写手)
★
qwky2010(金币+1):谢谢参与
qwky2010(金币+2): 谢谢啊 2011-06-29 15:57:12
我的载体是9kb，连了4kb进去，就正常连的，连上了，就是涂板后就长了几个，还好验证是正确的
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2楼2011-06-29 11:57:13
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天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★
qwky2010(金币+1):谢谢参与
qwky2010(金币+2): 谢谢啊 2011-06-29 15:57:26
西瓜(金币+1): 高手啊 2011-06-29 16:49:45
按照正常连接就可以了，不过连接体系，时间各种都得把握好，我原来将3.6kb的片段连接至一4.7的载体，一次OK。。。

祝你好运！

[ Last edited by 天使托 on 2011-6-29 at 12:08 ]
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3楼2011-06-29 12:06:09
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zyly605

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
qwky2010(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-29 16:49:36
在PCR目的片段的时候应该用高保真酶，然后根据片段浓度和载体浓度计算连接体系，然后就照常连接就可以了
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4楼2011-06-29 15:22:03
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