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chunmeiyang

银虫 (正式写手)

[求助] 有关pUC18为载体的融合蛋白的纯化!

各位大侠,请问有人纯化过pUC18为载体的融合蛋白吗,是用什么方法纯化的呀?谢谢指教!!
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

chunmeiyang(金币+2): 2011-06-28 13:45:55
用什么纯化方法要看融合蛋白的性质,特别是融合伴侣的亲和性,比如带His-tag的就用镍亲和层析。
另外还没kandao过用pUC18为载体的融合蛋白表达,这个载体没有现成的融合伴侣,而且是个克隆载体。
2楼2011-06-28 13:11:29
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
chunmeiyang(金币+5): 2011-06-28 13:47:01
西瓜(金币+5, EPI+1): 热心专家! 2011-06-28 18:34:46
看看这个文献:
用质粒pUC18在大肠杆菌中表达人蛋白质二硫键异构酶
3楼2011-06-28 13:15:33
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): Thank you for your comments! 2011-06-28 18:41:37
Unlike pET vectors, there is no  strong promoter element on pUC18.

So, it is not a best choice to express target protein.

How to purify your protein does not depend on the vector you used, but on the tag you choosed.
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2011-06-28 13:43:12
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