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zhangby2002

银虫 (小有名气)

[求助] 关于RNA的降解问题、、?

本人遇到以下问题请大虾们高见:
1 提取的总RNA ,跑焦检测有目标带,但是用DANaseI处理后,跑焦检测去除DNA的情况,降解的厉害,目的带模糊和不存在。
2 首先对于1我说明一下,我的DNAaseI是MBI公司(Fermentas),其中该公司的DNAaseI有RNase-free合成一管,我按照他们的protocoll去做啦。有另外加啦RNase抑制剂,大家有用过的话,也是这样加的吧
3 我以前去除DAN污染是用的TAKARA的DNAaseI 效果不错。
4 请大虾们分析一下1,2的原因及解决措施~
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业精于勤,荒于嬉;行成于思,毁于随。
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cona

银虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

zhangby2002(金币+1): 2011-06-28 13:39:23
zhangby2002(金币+1): 2011-06-29 13:55:21
zhangby2002(金币+2): 2011-07-04 13:53:44
zhangby2002(金币+6): 2011-07-21 09:05:06
提RNA需要尽可能干净的环境,操作的细节非常关键。我们在提RNA时,从来不加DANaseI处理,但仍然跑出清晰的三条带。用的是天根提取试剂盒!
2楼2011-06-28 12:44:18
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zhangby2002

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by cona at 2011-06-28 12:44:18:
提RNA需要尽可能干净的环境,操作的细节非常关键。我们在提RNA时,从来不加DANaseI处理,但仍然跑出清晰的三条带。用的是天根提取试剂盒!

其实我跑焦也是三条带,但是我做反转呀!不用去除DNA污染那样行??
业精于勤,荒于嬉;行成于思,毁于随。
3楼2011-06-28 13:40:23
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