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yupeibin

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【分子生物】EPI帖

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gwbk

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1楼 2011-06-25 11:04:52
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gwbk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

yupeibin(金币+2): 鼓励一下 2011-06-25 16:34:56
工厂有没有把他们的培养基也一起给你的？管他们要一个空白对照。另外把菌体离心下来，换新的无蛋白培养基作对照也是不错的想法。
推出微生物来源做DNA、RNA鉴定比较方便准确。
赞一下 回复此楼
2楼2011-06-25 14:04:50
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yupeibin

禁虫 (正式写手)
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3楼2011-06-25 16:11:29
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gwbk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yupeibin(金币+8): 2011-06-25 16:50:46
西瓜(金币+5, EPI+1): 很好！ 2011-06-25 18:18:36
4500rpm或者1500g离心10-20min，或者8000rpm离心3-5min，或者最大离心速率15s。
离心回收也是具体问题具体分析，有的菌离心不下来，可以先低速，收集完了，取上清再高速。
不知道你的菌体行不行，做酵母、大肠杆菌我都是这么做的。一般没有问题。回收率没有验证过，应该能回收绝大部分。

关键是把30种菌的单菌挑出来。利用各种方法，比如膜过滤除真菌，革兰氏染色细菌，菌落形态鉴定，菌体镜检等方法吧。一般能分开的。

得到单菌体，30个样品做一个蛋白电泳对比，分析哪些是需要的。
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4楼2011-06-25 16:46:15
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yupeibin

禁虫 (正式写手)
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5楼2011-06-25 16:50:29
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★
dhd997(金币+2): 2011-07-08 08:13:23
引用回帖:
Originally posted by gwbk at 2011-06-25 16:46:15:
4500rpm或者1500g离心10-20min，或者8000rpm离心3-5min，或者最大离心速率15s。
离心回收也是具体问题具体分析，有的菌离心不下来，可以先低速，收集完了，取上清再高速。
不知道你的菌体行不行，做酵母、大肠杆 ...

旧培养基里的麦麸也能被离心下来的，在接种到新的培养基之前，你怎么将麦麸和菌体分离？
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2011-07-08 02:03:23
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gwbk

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-08 02:03:23:
旧培养基里的麦麸也能被离心下来的，在接种到新的培养基之前，你怎么将麦麸和菌体分离？

因为要做下一步培养，麦麸在下一次培养中可被无限稀释。
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7楼2011-07-08 10:24:49
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gwbk

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
问题很细致，你有好方法？
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8楼2011-07-08 10:31:25
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
西瓜(金币+1): 能提问也是一个本事 2011-07-08 19:14:12
引用回帖:
Originally posted by gwbk at 2011-07-08 10:24:49:
因为要做下一步培养，麦麸在下一次培养中可被无限稀释。

问题是麦麸是固体，离心下来的量比原先培养基的含量少多少是个问题，无限稀释我觉得不会那么理想。

我也暂时没想到什么好方法，只是我也用麦麸，所以才提出这个问题，你的麦麸是怎么个用法的？
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9楼2011-07-08 15:38:27
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
Originally posted by gwbk at 2011-06-25 14:04:50:
工厂有没有把他们的培养基也一起给你的？管他们要一个空白对照。另外把菌体离心下来，换新的无蛋白培养基作对照也是不错的想法。
推出微生物来源做DNA、RNA鉴定比较方便准确。

你的无蛋白培养基是什么样的，配方如何？
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
10楼2011-07-08 19:32:06
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