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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)

[交流] DNA如何定量已有9人参与

如题,现在有一管DNA,想知道量大概有多少或者是说浓度大概是多少?我看DNA定量一般是用二苯胺法,是否还有其他方法来定量呢,请各位大侠指教,谢谢!
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-06-24 20:16:48
引用回帖:
Originally posted by susanbao at 2011-06-24 12:30:02:
一般来讲,DNA只能半定量,用OD280,要是需要比较准确的结果,可以用萤光定量PCR来做,不过就是需要比较多的设备和试计。

对你的说法持保留意见。

DNA和RNA在260nm处有最大的吸收峰,而蛋白质在280nm处有最大的吸收峰,定量DNA应该用OD260而不是OD280. 当OD260=1时,对应的双链DNA为50 ug/ml,单链DNA为37 ug/ml,RNA为40 ug/ml,Oligo为33 ug/ml。

楼主要求知道浓度,用分光光度法足矣。

荧光定量PCR是可以定量,可以精确到拷贝数,但需要的成本太高,仪器试剂贵,用在这里是大炮打蚊子,费时费力费钱。如只需知道浓度,远远不如分光光度法实际。

[ Last edited by 西瓜 on 2011-6-24 at 16:34 ]
8楼2011-06-24 16:33:10
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查看全部 17 个回答

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-06-24 11:11:41
可以用分光光度法,测OD260.具体可以百度下。
2楼2011-06-24 10:45:39
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+3): 赞成啊~跟Maker的条带比亮度就ok了。目测定量是做分子的应该掌握的技能。 2011-06-24 10:57:45
正如楼上所说,当然了你也可以跑个电泳看看亮度,用电脑上的照相的软件就可以大致定量的。。。

关键还是看你干什么了?如果做后期的酶切呀什么的,大概看看亮度就可以了。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-06-24 10:53:47
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susanbao

铁虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
一般来讲,DNA只能半定量,用OD280,要是需要比较准确的结果,可以用萤光定量PCR来做,不过就是需要比较多的设备和试计。
4楼2011-06-24 12:30:02
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