| 查看: 1898 | 回复: 9 | |||
ybQuan金虫 (著名写手)
|
[交流]
关于DNA提取的问题 已有6人参与
|
|
在提取昆虫DNA的时候，裂解液中加入一定的蛋白酶K，消化结束后加入醋酸甲沉淀杂质，然后用异丙醇沉淀DNA 我像我问的是：消化完后蛋白酶K要不要处理一下？有没有必要？ 百度里有人说要95°灭火15min，蛋白酶K对DNA质量有什么影响?如果95°灭火，那做PCR的时候预变性时候不是就可以了吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有133人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有关提取全血DNA和RNA问题。
已经有4人回复
- 基因组DNA提取问题
已经有32人回复
- DNA提取问题求解
已经有21人回复
- CTAB 基因提取方法的问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】关于提取基因组DNA过程中遇到的难题
已经有10人回复
- 【求助/交流】DNA提取问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】DNA提取问题
已经有25人回复
- 【求助/交流】关于DNA提取后测定OD值的问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】请教大家关于dna提取的问题
已经有17人回复
yuxia82012
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 4980
- 散金: 2225
- 红花: 2
- 帖子: 1340
- 在线: 426.5小时
- 虫号: 781881
- 注册: 2009-05-29
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
2楼2011-06-21 17:48:39
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
3楼2011-06-21 21:38:00
gwbk
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 54
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2293.5
- 红花: 24
- 帖子: 529
- 在线: 186.9小时
- 虫号: 1320681
- 注册: 2011-06-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2011-06-21 22:34:58
ybQuan
金虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1547.9
- 散金: 306
- 红花: 3
- 帖子: 1006
- 在线: 255.9小时
- 虫号: 828492
- 注册: 2009-08-15
- 性别: GG
- 专业: 植物保护生物技术
5楼2011-06-22 13:12:01
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
|
我们是用PCR仪当水浴锅而已……95度灭活是你提取DNA的最后一步，灭活之后的DNA可以存起来也可以直接进行后续的PCR实验。 我们做的是线虫，蛋白酶K处理之后再灭活蛋白酶，就可以直接作为PCR模板了，跟你们的材料不一样，方法也不一样。 我们沉淀DNA的方法跟你的差不多，只不过没用在这里。样品量大的话，可以用苯酚氯仿抽提。不过方法是越简单越好，你可以按原方法提取之后进行PCR，如果有问题，再加一步95度15分钟灭活蛋白酶K就好了，之后再进行PCR。 不要把灭活这步当成预变性直接PCR，首先蛋白酶K没灭活之前会降解Taq酶，其次95度15分钟的条件对Taq酶的活性破坏也很大。 |
6楼2011-06-22 15:17:12
ybQuan
金虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1547.9
- 散金: 306
- 红花: 3
- 帖子: 1006
- 在线: 255.9小时
- 虫号: 828492
- 注册: 2009-08-15
- 性别: GG
- 专业: 植物保护生物技术
7楼2011-06-23 10:13:02
zboter
银虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 255.5
- 帖子: 372
- 在线: 107.5小时
- 虫号: 865716
- 注册: 2009-10-08
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2011-06-23 15:52:17
 |
9楼2011-06-24 09:19:58
10楼2011-10-17 20:33:38
100