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ht300

铜虫 (小有名气)

[求助] klenow 酶生长dna链时为什么要先加热后迅速冷却 已有1人参与

klenow 酶生长dna链前为什么要先加热后迅速冷却,一般两条dna链要先加热后迅速冷却这是为什么?是不是让dna链展开?
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ht300

铜虫 (小有名气)

我是有一条长dna链(91碱基),和4种不同的短dna链互补,然后klenow 下让其中一条短dna链生长,把其他dna挤掉,其中长dna链接到磁珠上便于分离。
我做的过程是 磁珠上接长dna,磁分离后,加入所有短dna 37度结合3h 缓冲液tris,
然后磁分离,磁珠在分散开,加入klenow 生长3h,通过某种方法测试挤掉的一种短dna链
5楼2011-06-27 08:40:07
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-06-20 13:12:06
ht300(金币+2): 2011-06-21 09:08:49
silicare(EPI+1): 2011-06-27 12:04:45
是滴~加热是为了打开双链。如果标准速度冷却,又慢慢“退火”了,急冷就是为了继续保持单链状态
2楼2011-06-20 09:36:03
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ht300

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by ht300 at 2011-06-20 08:31:58:
klenow 酶生长dna链前为什么要先加热后迅速冷却,一般两条dna链要先加热后迅速冷却这是为什么?是不是让dna链展开?

可视本来就是两条单链放一起,准备互补后在用klenow 生长的啊
3楼2011-06-21 09:10:35
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

ht300(金币+2): 2011-06-27 08:34:23
引用回帖:
Originally posted by ht300 at 2011-06-21 09:10:35:
可视本来就是两条单链放一起,准备互补后在用klenow 生长的啊

能把你实验目的,步骤啥的贴出来看看么~这样搞不清具体情况,帮不上啥忙~
4楼2011-06-21 12:36:43
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