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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » klenow 酶生长dna链时为什么要先加热后迅速冷却
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ht300

铜虫 (小有名气)

[求助] klenow 酶生长dna链时为什么要先加热后迅速冷却 已有1人参与

klenow 酶生长dna链前为什么要先加热后迅速冷却，一般两条dna链要先加热后迅速冷却这是为什么？是不是让dna链展开？
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1楼 2011-06-20 08:31:58
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ht300

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ht300 at 2011-06-20 08:31:58:
klenow 酶生长dna链前为什么要先加热后迅速冷却，一般两条dna链要先加热后迅速冷却这是为什么？是不是让dna链展开？

可视本来就是两条单链放一起，准备互补后在用klenow 生长的啊
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3楼2011-06-21 09:10:35
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-06-20 13:12:06
ht300(金币+2): 2011-06-21 09:08:49
silicare(EPI+1): 2011-06-27 12:04:45
是滴～加热是为了打开双链。如果标准速度冷却，又慢慢“退火”了，急冷就是为了继续保持单链状态
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2楼2011-06-20 09:36:03
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

ht300(金币+2): 2011-06-27 08:34:23
引用回帖:
Originally posted by ht300 at 2011-06-21 09:10:35:
可视本来就是两条单链放一起，准备互补后在用klenow 生长的啊

能把你实验目的，步骤啥的贴出来看看么～这样搞不清具体情况，帮不上啥忙～
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4楼2011-06-21 12:36:43
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ht300

铜虫 (小有名气)
我是有一条长dna链（91碱基），和4种不同的短dna链互补，然后klenow 下让其中一条短dna链生长，把其他dna挤掉，其中长dna链接到磁珠上便于分离。
我做的过程是 磁珠上接长dna，磁分离后，加入所有短dna 37度结合3h 缓冲液tris，
然后磁分离，磁珠在分散开，加入klenow 生长3h，通过某种方法测试挤掉的一种短dna链
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5楼2011-06-27 08:40:07
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