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tongxinkxy

银虫 (小有名气)

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[求助] 250bp，可以直接测序，不转载体吗？

250bp，可以直接测序，不转载体吗？
可以用双向测序，就可以得到全部确切的序列，这样理解对吗？

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1楼 2011-06-19 20:28:39

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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
tongxinkxy(金币+8): 2011-06-20 08:16:38
lstt09nk(金币+3): 感谢交流 2011-06-20 13:07:01

1 pcr产物测序，需要非简并引物

2  如果特异引物扩增，条带浓度达到回收要求，可以pcr产物测序。

3  根本不需要双向，一个反应足够了。

4  鉴于pcr产物测序会损失部分序列，结果肯定没有200bp了。即便双向测序，也无法得到准确全部序列。

5  200bp的产物，做载体连接成功率非常高，推荐如果不是特别着急，还是转了吧。

解答完毕。