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关于RNA以及cDNA电泳问题,拜求各位大侠指点
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虾米我实验的目的是先提取RNA,然后将其反转录成cDNA,以cDNA为模板,进行 PCR以获取目的片段。实验材料为细菌,提取RNA 后进行紫外分光进行检测浓度, 浓度比较高,260与280的OD比值也符合实验要求。但是反转录后进行PCR无条 带,高手指点后对RNA进行电泳,电泳无条带,同时Marker有条带,证明是可能是 RNA问题,个人总结认为是RNA发生降解,但不知道其降解过程发生在电泳过程中 还是保存过程中,提RNA完全按照说明书进行,而且不明白RNA浓度高但电泳无条 带的原理,就是浓度与完整性的关系。另外,如果出现这样的问题,应该如何避 免,虾米还应该如何操作?另附RNA和cDNA电泳图两张,请大侠指教!我的全部身 家就两个金币了……全都给你了……虽然不多…… PS:问题基本如下 1 电泳无条带原因 2 RNA浓度与其完整性关系 3 出现问题,如何解决 |
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soffy0214
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10楼2012-07-02 14:28:44









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