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blueghost006

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 48
帖子: 17
在线: 4.3小时
虫号: 1313134
注册: 2011-06-02
性别: GG
专业: 植物生理与生化

[求助] 求助Western-bot转膜问题

各位大虾，
小子我初学做Western-blot,做了三次，每次转膜后发现PVDF膜上没有一点MARK痕迹，（转膜前胶上MARK条带非常清楚），我用的是湿转法，100V，45分钟，目标蛋白为41KD，当然接下来的结果就是膜上什么都没有，一片空白，这是怎么回事呀？小子我都快崩溃了，敬请各位大虾指点迷津~~~~

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1楼 2011-06-02 21:22:49

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yj507

金虫 (初入文坛)

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应助: 1 (幼儿园)
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虫号: 445600
注册: 2007-10-28
性别: MM
专业: 基因表达调控与表观遗传学

【答案】应助回帖

这么纠结。。。
如果你的buffer没问题、仪器没问题、操作没问题，就做一个转膜时间测试吧，10分钟、20分钟、30分钟看看你的胶和PVDF膜上的情况。而且你师兄师姐都有做这个实验，可以请他们在你做的时候指导一下啊，另外就是问问他们试剂有没有什么问题。

14楼2011-06-04 13:29:07

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