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yicao917

木虫 (小有名气)

[求助] 谁做过淀粉凝胶电泳的啊

请问淀粉凝胶电泳一定要用马铃薯淀粉做吗?木薯淀粉或玉米淀粉行吗?淀粉加热后很多气泡,真空脱气也无法脱干净怎么办?
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, EPI+1): 见一次不容易啊 2011-05-29 09:33:43
yicao917(金币+10): 2011-05-29 21:08:00
淀粉凝胶电泳的目的是检测样品中有多少个淀粉酶组分,目标明确不要模糊,以后的操作设计也以这个为目的。

选用淀粉的种类主要看课题要求,如果课题是用这个酶来降解马铃薯或者木薯的,那就可以用相应的淀粉,不是说有什么规定,非要用什么淀粉,而是要看课题相关。

淀粉加热会产生气泡?说的是生淀粉加热吗?生淀粉加热到一定程度会糊化,但不会有气泡的,你脱气是怎么回事?你做蛋白质电泳有什么特殊要求?

生淀粉是颗粒状的,做胶的时候要摇匀而且凝固速度要快。如果不是非要做生淀粉酶的组分分析,那你可以用可溶性淀粉溶解到分离胶缓冲液。反正生淀粉加热之后会糊化,生淀粉晶体结构被破坏了就不再是生淀粉了,没有生淀粉结合域的淀粉酶也能降解的,用这样的糊化淀粉做分离胶看得出来的就不再仅有生淀粉酶了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-05-29 00:49:25
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yicao917

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-29 00:49:25:
淀粉凝胶电泳的目的是检测样品中有多少个淀粉酶组分,目标明确不要模糊,以后的操作设计也以这个为目的。

选用淀粉的种类主要看课题要求,如果课题是用这个酶来降解马铃薯或者木薯的,那就可以用相应的淀粉,不 ...

能把你们做电泳凝胶的实验方案传给我吗?谢谢!
3楼2011-05-29 15:17:12
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yicao917

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-29 00:49:25:
淀粉凝胶电泳的目的是检测样品中有多少个淀粉酶组分,目标明确不要模糊,以后的操作设计也以这个为目的。

选用淀粉的种类主要看课题要求,如果课题是用这个酶来降解马铃薯或者木薯的,那就可以用相应的淀粉,不 ...

我用木薯淀粉和玉米淀粉都做过,文献上说是马铃薯淀粉和可溶性淀粉按14:5比例混合,加热后会有气泡要脱气,我把马铃薯淀粉换掉,比例一样,加热后有气泡生成,但是粘度很大,脱气脱不彻底。
4楼2011-05-29 15:32:34
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

你为什么要做这个凝胶实验?私下交流。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2011-05-29 16:15:24
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