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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 没有polyA怎么逆转录？
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biofeixue

木虫 (著名写手)

[求助] 没有polyA怎么逆转录？

我最近查了一些基因，想看看他们受环境的影响是表达多了还是少了？
结果发现这些基因的3端都没有polyA尾巴，为什么？另外如果没有polyA尾巴，我怎么逆转录？
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1楼2011-05-27 09:21:03
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
dhd997(金币+2): 热心鼓励一下 2011-05-27 19:27:26
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2011-05-27 13:59:29:
我说的是引物，直接设计特异引物，比用oligo dT好多了

定量用的荧光定量PCR是用特异引物的，所以一般可以反转录出总的cDNA，这样子一份cDNA样品可以检测多个基因。定量时除了扩展目的基因，还需扩增actin、tublin等内参基因，作为样品量的校正。
如果在反转录时就用特异引物，那就浪费反转录酶啦。然后内参怎么做呢？
用特异性引物作反转录我是听说过，不过自己没做过，也许有些方面用特异性引物更好。请指教哦
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-05-27 14:06:53
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