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xingqing3026新虫 (小有名气)
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[求助]
拜托各位个人帮忙分析下这是什么情况，好神奇呀
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PCR产物跑胶出现了这种情况，第一张图为什么整个泳道都是亮的呢？这是反转录的cDNA进行PCR的结果 第二张图是普通的PCR结果有些泳道里出现蓝紫色的光，是什么原因呢？ 拜托大家帮忙分析下   |
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 【分子生物】EPI帖 |
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5楼2011-05-26 16:31:23
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2楼2011-05-26 15:49:33
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【答案】应助回帖
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西瓜(金币+5, EPI+1): 很好~ 2011-05-26 16:25:30
xingqing3026(金币+5): 谢谢呢，嘿嘿主要是我平时一直这样操作的，第一次见这样的 2011-05-26 16:42:05
西瓜(金币+5, EPI+1): 很好~ 2011-05-26 16:25:30
xingqing3026(金币+5): 谢谢呢，嘿嘿主要是我平时一直这样操作的，第一次见这样的 2011-05-26 16:42:05
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第一张图，是DNA电泳拖尾，主要从以下两个方面考虑： 1、PCR产物自身原因： 可能是由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多，而造成PCR的非特异性产物 过多。此外是模板的质量问题，模板不纯的话若是含有RNA的话也会出现拖尾，再者是DNA降解的可能。 2、电泳体系的问题： （1）电泳缓冲液TAE或者TBE的污染，建议更换缓冲液。（2）上样时样品漂了，建议增加上样缓冲液的用量，以及小心加样。（3）电压太高。（4）电泳时间过长 第二张图，DNA的颜色为蓝紫光，可能和你拍照的背景有关系，如果不是，你可以好好研究研究了~ |
3楼2011-05-26 16:06:27
西瓜
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