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双元表达载体 农杆菌EHA105
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116093626
新虫
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虫号: 1305305
[交流]
双元表达载体 农杆菌EHA105
我想用农杆菌EHA105构建双元表达载体,我手上现在有pcambia1301,和空的农杆菌EHA105,是不是还需要一个带有Vir基因的辅助质粒。将1301和辅助质粒一起转到农杆菌里?
多谢大家!
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1楼
2011-05-25 20:27:08
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jinyuw
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+0.5
):给个红包,谢谢回帖
jhu132llh(金币+2): 鼓励积极交流 2011-05-30 09:27:59
敢问二楼的,农杆菌EHA104和EHA105有和区别呀,我正在做EHA104的转化。
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4楼
2011-05-29 21:18:09
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咸鱼
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116093626(金币
+1
):谢谢参与
jhu132llh(金币+5, EPI+1): 是滴,鼓励积极帮助新虫 2011-05-26 09:27:05
引用回帖:
Originally posted by
116093626
at 2011-05-25 20:27:08:
我想用农杆菌EHA105构建双元表达载体,我手上现在有pcambia1301,和空的农杆菌EHA105,是不是还需要一个带有Vir基因的辅助质粒。将1301和辅助质粒一起转到农杆菌里?
多谢大家!
不需要,你需要将你的基因先克隆到一个有启动子的载体上,然后将启动子一起切下来连接到pCambia1301上,然后转化EHA105即可。因为1301在多克隆位点前无启动子。
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Bella0224
2楼
2011-05-25 21:01:14
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jhu132llh(金币+3): 积极提问交流奖 2011-05-26 09:27:35
引用回帖:
Originally posted by
咸鱼
at 2011-05-25 21:01:14:
不需要,你需要将你的基因先克隆到一个有启动子的载体上,然后将启动子一起切下来连接到pCambia1301上,然后转化EHA105即可。因为1301在多克隆位点前无启动子。
双元表达载体不是一个质粒带有t-dna 一个质粒带Vir基因么?1301上也没有Vir基因呀
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3楼
2011-05-25 21:27:45
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Bella0224
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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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引用回帖:
297353楼
:
Originally posted by
咸鱼
at 2011-05-25 21:01:14
不需要,你需要将你的基因先克隆到一个有启动子的载体上,然后将启动子一起切下来连接到pCambia1301上,然后转化EHA105即可。因为1301在多克隆位点前无启动子。...
我也在做利用农杆菌的双元表达载体,请问这位虫友,我是否也一样要把我的目的基因克隆岛一个含有启动子的载体上呢?这个载体怎么选择呢?还是有常用的,还是都可以呢?
之后将启动子切下连接到我的另外含T-DNA的载体上,直接转化进入我的农杆菌感受态细胞就可以了么?
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5楼
2013-03-13 17:02:20
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