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求助 直接法提取沉积物DNA怎样超过20kb
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xintutiao
金虫
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虫号: 1152401
注册: 2010-11-21
专业: 环境微生物学
[交流]
求助 直接法提取沉积物DNA怎样超过20kb
已有8人参与
请教各位大侠,我们实验室只能用直接法提取沉积物中的DNA,因为超速离心机坏了,现在一直用酚氯仿异戊醇提的,始终都是20kb,请问 我要是想提大片段的DNA 该怎么办 谢谢啦~
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2011-05-12 16:57:36
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):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-05-12 19:01:47
20KB是不是就不能用了?如果用来构建文库,那还是可以的。
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4楼
2011-05-12 18:45:44
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):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+5, EPI+1): 专业啊 2011-05-13 09:18:58
即使是六七厘米长的琼脂糖凝胶也是能分开40和20KB的,只要不是由于DNA样品太多造成堵车,N条带N合一成一坨。如果DNA太多,那就稀释,再在同一个泳道上两个M,一个是λ线性大约40多KB,另一个是λ/EcoR1(最大的一条带是21KB),M应该是能分离开的,要是不能分开,那我也不知道原因了。实在不行就做超过十厘米长的凝胶,我们喜欢用这个来纯化未培养微生物DNA。
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7楼
2011-05-13 01:14:52
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