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楼1970-01-01 08:00:00

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我们都爱小木虫

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科研从小木虫开始，人人为我，我为人人

qingshi2

银虫 (小有名气)

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我根据一篇文献，先在低温下5个循环，然后再提高退火温度30个循环，这样出来条带比较亮，引物的特意性不是很好，有两条较量的带，需要切胶回收

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6楼2011-05-10 09:32:01

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zz217

铁杆木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★
wolfebst(金币+1): 谢谢 2011-05-01 23:04:39
qingshi2(金币+1): 2011-05-10 09:33:20

稍微降一点退火温度试试
dimer应该不是问题

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2楼2011-05-01 21:12:50

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xuelian11986

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
wolfebst(金币+3): 鼓励新虫多多交流 2011-05-03 12:58:37
qingshi2(金币+1): 2011-05-10 09:33:31

除了退火温度以外，dimer的量可以适当减少，尽量全程冰上完成

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3楼2011-05-03 10:51:01

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starseacow

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【答案】应助回帖

调退火温度，有条件跑个温度梯度PCR；适当加大模板量；调整Mg离子浓度，降一点试试；把要加的上下游引物预混，沸水浴5 min，迅速冰浴冷却，加入PCR体系中再做也是一法；最后，王道是重新设计合成几对引物试试。

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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息

4楼2011-05-03 12:49:34

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