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hebeilishw

金虫 (小有名气)

[交流] 关于DNA marker 的一些问题 已有3人参与

各位都知道提取的质粒跑电泳时会有三条带,从下到上一次是超螺旋,线性,开环,而且有一定的差距,而且超螺旋的往往是主要的带,那么咱们平时用的marker是超螺旋的还是线性的,如果是线性的那么用来比较超螺旋质粒的大小还准确吗?
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amisking(金币+2): 鼓励发帖应助。 2011-05-01 20:02:58
就看你用什么样的Ladder了,有的是螺旋的,比如λDNA有线性也有落选的,但是1kb Ladder就是片段而已,不是螺旋。线性的和螺旋的相比肯定是不准确的。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-05-01 17:51:49
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xiaoweiwei121

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西瓜(金币+2): 牛啊~ 2011-05-02 08:38:58
不准确
但是要提醒一下,提的质粒,未必是超螺旋,线性,开环
虽然这种解释在我们脑子中基本根深蒂固了
现在更倾向于是:超螺旋,开环,复制中间体
3楼2011-05-02 01:23:58
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hebeilishw

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xiaoweiwei121 at 2011-05-02 01:23:58:
不准确
但是要提醒一下,提的质粒,未必是超螺旋,线性,开环
虽然这种解释在我们脑子中基本根深蒂固了
现在更倾向于是:超螺旋,开环,复制中间体

新解,谢谢斑竹!
4楼2011-05-04 14:57:49
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


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引用回帖:
Originally posted by xiaoweiwei121 at 2011-05-02 01:23:58:
不准确
但是要提醒一下,提的质粒,未必是超螺旋,线性,开环
虽然这种解释在我们脑子中基本根深蒂固了
现在更倾向于是:超螺旋,开环,复制中间体

那么以现在的观点,线性排在哪里呢?请赐教哈
5楼2011-05-04 16:41:00
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xiaoweiwei121

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西瓜(金币+3): 厉害~学习了! 2011-05-05 09:05:04
引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-05-04 16:41:00:
那么以现在的观点,线性排在哪里呢?请赐教哈

看胶浓度吧
0.8的话,在超螺旋和开环之间
你可以找个酶切一下
其实电泳一下就能看出来,单酶切之后的线性条带和碱法提出来的质粒的三条带么有重合的

[ Last edited by xiaoweiwei121 on 2011-5-5 at 04:32 ]
6楼2011-05-05 00:06:20
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