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请教重组质粒快检的具体方法以及原理。。。。
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天使托
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[交流]
请教重组质粒快检的具体方法以及原理。。。。
昨日看见某帖子说关于验证重组载体,楼下有位朋友说用快检的方法可以迅速检测出来。。。
这是该朋友的回帖的原内容:
快检就是直接用摇起的菌液取100uL,加50uL的苯酚和50uL的氯仿涡旋离心,
取上清跑胶,对照上个空载体,就是没有连片段前的质粒(环合的哈),
或者和你载体差不多大小的质粒也可,一般连进去的重组质粒会跑得慢点,
凭这个就能鉴定哪些连进去了,然后再提质粒酶切就好了
因为我们实验室就是一般的PCR,酶切质粒来验证,快检没有做过,所以我想问问大家具体的方法是什么?原理又是怎样?谢谢了!
苯酚和氯仿的作用是什么呢?
谢谢了。。。。。
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2011-04-29 10:45:38
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lww49731002
新虫
(初入文坛)
应助: 0
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金币: 14.5
帖子: 2
在线: 1.2小时
虫号: 1187161
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
问题是,如果是载体自连跑出来的条带也会比空质粒滞后,那要怎么判断??
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(1人)
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13楼
2011-05-16 11:24:39
已阅
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