应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 液相测定样品 保留时间不稳定？怎么办？？
51/1返回列表
查看: 2508  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

laoyisng1122

铁虫 (正式写手)

[求助] 液相测定样品 保留时间不稳定？怎么办？？

EDTA铁的液相检测问题
采用液相检测EDTA铁，保留时间不稳定，第一天6.6分，第二天10分，第三天3分，第四天10分

保留时间跟我玩起来捉迷藏有戏，请大家多多指教。以下是详细内容。

柱子 Agilent XDB C8

流动相：40%四丁基氢氧化铵溶液3.25ml加水130ml，再用8.8%甲酸溶液调PH至3.30，加甲醇125ml，再用水稀释至1000ml
，此时PH约为3.50

液相条件 波长254nm ，流速1.0ml/min进样量20  EDTA铁浓度0.1mg/ML


第一天：保留时间6.6 分，没在意

第二天：使用前一天流动相、柱子，保留时间跑到10分，以为是EDTA铁在新使用的柱子上有一定饱和时限，所以勉强解释了一下，希望以后会稳定。继续试验

第三天：新换流动相，柱子未换，保留时间跑到3分，以为甲醇加多了或者试剂的问题，狂配流动相，连续更换3次流动相，样品保留时间均在3分。
放弃，无语了。

第四天：死马当活马医，继续用前一天的柱子，流动相，前一天的样品，保留时间重新回到了10分。

以上样品在四天检测当中，峰形和峰面积没有明显变化。

分析以上：排除了流动相、样品、柱子、仪器的因素，实在找不出原因了。还怀疑是流动相的PH导致样品不稳定，后来查询了EDTA铁的PKA在pKPK1=0.0 (CO2H)
pK2=1.5 (CO2H)
pK3=2.00 (CO2H)
pK4=2.69 (CO2H)
pK5=6.13 (NH+)
pK6=10.37 (NH+)  来自维基百科

EDTA铁为二元酸  PKA为2.00 依据此 在PH3.5 是稳定的  

为什么呢？ 不过从目前来看，好像是流动相PH的原因啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-04-29 10:45:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢回复！ 2011-04-30 00:35:52
pH在样品的pKa±1内，保留时间变化最大。
调pH时注意温度对pH计及pH的影响，校准及测量温度控制在25±1内。
另外，注意柱温箱控温。
赞一下(1人) 回复此楼
守候在风中的宁静。
3楼2011-04-29 12:40:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

weirb

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 3Q 2011-04-30 00:35:24
反相柱流动相中使用离子对试剂（四丁基氢氧化铵）要充分平衡，使其在固定相上充分饱和才可以，40%的四丁基氢氧化铵溶液至少要80ml以上，可以用0.1ml/min的流动相过夜，再测。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-04-29 11:59:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulangtj

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 多谢提供！ 2011-04-30 00:36:05
第一天：甲醇按照比例配制，合适。时间6min
第二天：原流动相中的甲醇过夜挥发，时间10min
第三天：重配流动相，配错了。
第四天：甲醇又挥发了，刚好10min。
换个人试试或者双人复核吧，看你就知道刚入行，道行太浅。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-04-29 13:14:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laoyisng1122

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by liulangtj at 2011-04-29 13:14:54:
第一天：甲醇按照比例配制，合适。时间6min
第二天：原流动相中的甲醇过夜挥发，时间10min
第三天：重配流动相，配错了。
第四天：甲醇又挥发了，刚好10min。
换个人试试或者双人复核吧，看你就知道刚入行，道 ...

您好  那请问 我第三天 在同一天之内配三次流动相 都是在3分钟 怎么解释

难道三次都配错了

敢问  您老入行多久了

不过有没有能力 好像跟入行时间不成正比吧
赞一下 回复此楼
5楼2011-05-03 14:52:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[硕博家园] 深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿） +4 xujiaoszu 2026-03-11 8/400 2026-03-16 09:45 by xujiaoszu
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 274求调剂 +4 时间点 2026-03-13 4/200 2026-03-15 15:29 by Rambo13
[考研] 289求调剂 +5 步川酷紫123 2026-03-11 5/250 2026-03-15 00:45 by kruisytel
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 抓着星星的女孩 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:47 by userper
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] （081700）化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +10 dream…… 2026-03-10 12/600 2026-03-12 13:46 by dream……
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭