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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 一般蛋白marker上样，需要100度煮沸5分钟，双向电泳上样蛋白样品是否需要煮沸呢？？
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hrjxx

新虫 (小有名气)

[交流] 一般蛋白marker上样，需要100度煮沸5分钟，双向电泳上样蛋白样品是否需要煮沸呢？？

如果不需要又是为什么呢？？是不是煮沸下效果更好呢 ？？希望知道的不吝赐教啊
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1楼2011-04-29 10:29:54
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shenhaiwang

金虫 (小有名气)
★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-04-29 19:04:34
hrjxx(金币+1): 加热不是为了变性吗，这样不是应该增加溶解度吗 2011-05-02 22:23:27
双向电泳样品处理最大的目的就是尽可能的增加蛋白质的溶解度和解聚程度，加热有可能是蛋白的溶解度下降，不利于电泳。
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4楼2011-04-29 13:19:27
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shenhaiwang

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
hrjxx(金币+1):谢谢参与
hrjxx(金币+2): 水化液里不也是加了尿素，dtt.chaps等使蛋白变性吗？ 2011-04-29 12:37:14
西瓜(金币+5, EPI+1): 解释很清楚，学习了！ 2011-04-29 23:53:02
不需要煮了，直接加溴酚蓝即可。因为双向电泳本来就是先按照自身所带电荷进行第一向分离，煮过后蛋白就会变性，自身所带电荷就会改变，影响实验结果。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-04-29 10:41:46
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hrjxx

新虫 (小有名气)
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-04-29 13:02:34
1949stone(金币-1): 搞错了 不好意思 2011-04-29 13:04:35
水化液里不也是加了尿素，dtt.chaps等使蛋白变性吗？
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-04-29 12:37:04
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tangbohejin5楼
2011-04-29 22:19   回复  
hrjxx(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by shenhaiwang at 2011-04-29 13:19:27: 双向电泳样品处理最大的目的就是尽可能的增加蛋白质的溶解度和解聚程度，加热有可能是蛋白的溶解度下降，不利于电泳。

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