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dhmdddd

木虫 (正式写手)

[求助] 请教关于宝公司pMD18T连接问题

用pMD18T连接PCR产物,老是连不上,最开始只知道利用的是polyA和载体上的T连接起来,今天看了看T载的说明书感到有点小疑惑,连接做了几次,单跑质粒的后就是话感觉大小是对的,但是酶切后面再看就不对了,这是不是压根就没有连上?还是什么情况?求解释……补充一下,我的目的基因两边的酶切位点是EcoR I 和BamH I

[ Last edited by dhmdddd on 2011-4-26 at 15:51 ]
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上班族,学习ing……
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

dhmdddd(金币+1): 我用的加酶有加A,但是后面连的时候总是问题…… 2011-04-26 18:38:14
不是ployA,是DNA聚合酶扩增时能在PCR产物5‘端加上一个A。
因此做TA克隆,先看看你用的酶有没有加A功能。
Thank-you,so-blue.
2楼2011-04-26 16:37:43
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