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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 为什么DNA测序每个反应只能准确测出大约500bp
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南海所老龚

新虫 (正式写手)

[求助] 为什么DNA测序每个反应只能准确测出大约500bp

大家好，本人刚接触分子生物学，遇到一个问题，向各位大侠请教：
为什么DNA测序每个反应只能准确测出大约500bp？如果再测的话峰变得杂，结果就不准了。
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TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
1楼 2011-04-26 09:00:07
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yabxxh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
reasonspare(金币+2): 谢谢分享 2011-04-26 11:20:44
不是说只能测出500bp，只是说引物后端50bp左右的片段会测不准，现在一般都能测到700bp以上了
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2楼2011-04-26 09:02:50
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南海所老龚

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yabxxh at 2011-04-26 09:02:50:
不是说只能测出500bp，只是说引物后端50bp左右的片段会测不准，现在一般都能测到700bp以上了

为什么700bp以后据测不准了呢？
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TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
3楼2011-04-26 09:05:47
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

【答案】应助回帖

★ ★
reasonspare(金币+2): 谢谢分享 2011-04-26 11:21:00
南海所老龚(金币+1): 2011-04-26 12:31:54
因为是酶的问题
测序用的酶没有外切酶活性，所以不会校对碱基能力，只有在500bp内具有准确性
，再长了就人家就不对多余的测序结果的准确性负责任
当然了，随着科学的进步这个是会越来越长的，现在不就有700bp了嘛
将来会越来越好的
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
4楼2011-04-26 09:34:36
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zgb1982

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

目前在一个公司测序，基本能测到900BP是准确的了
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5楼2011-04-26 11:14:27
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
lstt09nk(金币+1): 感谢交流~ 2011-04-26 22:30:03
是滴～不光与酶有关，并且与你反应体系，跑胶的速度误差有关（如果是毛细管测序的话～）
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6楼2011-04-26 14:30:17
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beibei9535

荣誉版主 (职业作家)

晕晕小版主~ 姑娘你好！

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

出现杂峰就不能要了，所以我们一般以800bp为基准。过了就要做两个到多个反应了、
与酶活也有关系。
最好是做双向测序了~
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最好的年龄是，那一天，终于知道并且坚信自己有多好，不是虚张，不是夸浮，不是众人捧，是内心明明澈澈知道：是的，我就是这么好。
7楼2011-05-02 11:30:35
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南海所老龚

新虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by beibei9535 at 2011-05-02 11:30:35:
出现杂峰就不能要了，所以我们一般以800bp为基准。过了就要做两个到多个反应了、
与酶活也有关系。
最好是做双向测序了~

嗯嗯，相信技术在进步，以后说不定一个反应就能搞定了。
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8楼2011-05-02 12:33:16
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