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wangchunling

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[交流] 这样做胶回收可以吗已有7人参与

pcr之后的琼脂糖胶，直接把目的条带切下来放在90多度热水中过5分钟左右，然后吸取上层溶液做纯化连接可以吗？

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1楼 2011-04-21 11:16:44

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yuxia82012

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1949stone(金币+2): 鼓励 2011-04-21 15:45:44

不可以，你本身配琼脂糖的缓冲液里是含盐的，还有琼脂糖，这些都会影响连接酶的效率，最好还是用胶回收试剂盒回收吧

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在等待中涅槃重生

2楼2011-04-21 11:40:48

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西瓜

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1949stone(金币+4): 给不给你epi呢 2011-04-21 15:46:07

楼主这方法哪来的？我是没听说过呢。
我只听说过用试剂盒胶回收的，孤陋寡闻了……
个人认为“90多度热水中过5分钟”并不能使琼脂糖胶融化，估计DNA出不来的。
楼主的方法如果有人用过也做得出来，不如分享下详细步骤哈，至少偶很感兴趣，嘿嘿

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3楼2011-04-21 11:48:21

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wangchunling

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引用回帖:

Originally posted by 西瓜 at 2011-04-21 11:48:21:
楼主这方法哪来的？我是没听说过呢。
我只听说过用试剂盒胶回收的，孤陋寡闻了……
个人认为“90多度热水中过5分钟”并不能使琼脂糖胶融化，估计DNA出不来的。
楼主的方法如果有人用过也做得出来，不如分享下详 ...

呃

这是我的老师告诉我的方法，他说，在90多度的时候dna变性，单链dna就会跑到溶液里了……但我还没做成功……