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woaipan

铜虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助】急！有木有做过Tricine－SDS－PAGE小分子蛋白电泳的进！

我最近在纯化蛋白，估计纯化得到的蛋白分子量挺小的，低于10kD，想用tricine－sds-page电泳跑一下看看，但是查了资料这种电泳需配置阴极和阳极两种电泳缓冲液，我照着说明配好了，现在不知道如何使用，具体怎么加到电泳槽中。以前做sds-page的时候只需要加一种电泳缓冲液，所以糊涂了。
注：文献中说是阳极电泳液加到底部，阴极的则加在上部。
亟待各位大虾的帮助和解决！

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电泳、bio-rad 电转化仪及操作

蛋白纯化

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1楼 2011-04-16 15:42:11

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丢lai丢qu

铁虫 (初入文坛)

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虫号: 3224208

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

5楼: Originally posted by rhy1027 at 2011-04-18 17:36:47
我跑过Trcine-SDS-PAGE.我的蛋白3.5KD。其实你不一定需要配阴极阳极液，直接配3层梯度胶就可以，running buffer 加大离子强度，然后再冰上跑就没问题了！当然如果钱不是问题的话，更简单，买Invitrogen的4-16%梯度分 ...

您能帮我看一下我做的这个小分子的电泳跑成这样的原因吗？万分感谢