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【求助】急!有木有做过Tricine-SDS-PAGE小分子蛋白电泳的进!
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woaipan
铜虫
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虫号: 894791
[交流]
【求助】急!有木有做过Tricine-SDS-PAGE小分子蛋白电泳的进!
我最近在纯化蛋白,估计纯化得到的蛋白分子量挺小的,低于10kD,想用tricine-sds-page电泳跑一下看看,但是查了资料这种电泳需配置阴极和阳极两种电泳缓冲液,我照着说明配好了,现在不知道如何使用,具体怎么加到电泳槽中。以前做sds-page的时候只需要加一种电泳缓冲液,所以糊涂了。
注:文献中说是阳极电泳液加到底部,阴极的则加在上部。
亟待各位大虾的帮助和解决!
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2011-04-16 15:42:11
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woaipan
铜虫
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虫号: 894791
貌似如果用一般的缓冲液电泳系统还是连续的,tricine好像就是不连续的电泳体系,所以好像必须得用阴阳极的缓冲液!
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4楼
2011-04-16 19:12:58
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woaipan
铜虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
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帖子: 26
在线: 13小时
虫号: 894791
,自己先顶一个,怎么木有人啊~,救命啊
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2楼
2011-04-16 15:49:16
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mamadexiao
木虫
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虫号: 576831
woaipan(金币+1): 2011-04-18 15:50:58
我觉得是不是那种中型胶板阿,上下各自装缓冲液的那种
另外,用TRICINE配的胶似乎也可以在一般的缓冲液里跑啊...
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3楼
2011-04-16 18:13:37
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rhy1027
金虫
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BioEPI: 6
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在线: 108.4小时
虫号: 509301
★ ★ ★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+2, EPI+1): 谢谢参与 2011-04-18 18:30:34
我跑过Trcine-SDS-PAGE.我的蛋白3.5KD。其实你不一定需要配阴极阳极液,直接配3层梯度胶就可以,running buffer 加大离子强度,然后再冰上跑就没问题了!当然如果钱不是问题的话,更简单,买Invitrogen的4-16%梯度分离胶,效果也不错的!
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5楼
2011-04-18 17:36:47
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