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woaipan

铜虫 (初入文坛)


[交流] 【求助】急!有木有做过Tricine-SDS-PAGE小分子蛋白电泳的进!

我最近在纯化蛋白,估计纯化得到的蛋白分子量挺小的,低于10kD,想用tricine-sds-page电泳跑一下看看,但是查了资料这种电泳需配置阴极和阳极两种电泳缓冲液,我照着说明配好了,现在不知道如何使用,具体怎么加到电泳槽中。以前做sds-page的时候只需要加一种电泳缓冲液,所以糊涂了。
注:文献中说是阳极电泳液加到底部,阴极的则加在上部。
亟待各位大虾的帮助和解决!
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rhy1027

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+2, EPI+1): 谢谢参与 2011-04-18 18:30:34
我跑过Trcine-SDS-PAGE.我的蛋白3.5KD。其实你不一定需要配阴极阳极液,直接配3层梯度胶就可以,running buffer 加大离子强度,然后再冰上跑就没问题了!当然如果钱不是问题的话,更简单,买Invitrogen的4-16%梯度分离胶,效果也不错的!
5楼2011-04-18 17:36:47
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woaipan

铜虫 (初入文坛)


,自己先顶一个,怎么木有人啊~,救命啊
2楼2011-04-16 15:49:16
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mamadexiao

木虫 (正式写手)


woaipan(金币+1): 2011-04-18 15:50:58
我觉得是不是那种中型胶板阿,上下各自装缓冲液的那种
另外,用TRICINE配的胶似乎也可以在一般的缓冲液里跑啊...
3楼2011-04-16 18:13:37
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woaipan

铜虫 (初入文坛)


貌似如果用一般的缓冲液电泳系统还是连续的,tricine好像就是不连续的电泳体系,所以好像必须得用阴阳极的缓冲液!
4楼2011-04-16 19:12:58
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