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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 3074.5
帖子: 729
在线: 221.5小时
虫号: 483157

[交流] 【求助/交流】表达载体转化后,提取的质粒和原来不一样了啊

表达载体构建好以后，转化进pET29a，从转化子中重新提取质粒，发现质粒大小部队了，打了大约600bp，但是酶切验证还是有我连上去的目的片段，太纠结了！！
有没有给解释下的啊~~~
郁闷中

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1楼2011-04-13 11:38:07

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天使托

专家顾问 (职业作家)

★
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-04-13 16:20:14
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-04-13 21:22:14

你提取出来的重组质粒大小很有可能会变化，因为质粒在菌中的形态是变化的，你可以做酶切验证，然后跑电泳验证，跑电泳的时候可以将你当时酶切质粒和酶切的基因也点上作为对照，这样如果条带正确那么重组质粒也是没有任何问题的！
当然了也可以用你提取出来的质粒作为模板进行PCR验证你的目的基因。

祝好运！

赞一下(1人)

2楼2011-04-13 13:47:57

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