应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助大肠杆菌电转化
51/1返回列表
查看: 1476  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

dingyi0311

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求助大肠杆菌电转化 已有3人参与

我用的野生的大肠杆菌电转化，很多次了都没有转化出来，但是质粒转DH5a很容易，我想问下会不会是野生的大肠的表面荚膜的原因，怎么去掉荚膜。我的电转的步骤是水洗2次10%甘油洗两次。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-04-12 11:15:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+6, EPI+1): 把相关帖子粘贴过来，更像专家了。 2011-04-12 13:23:49
我想知道你所说的大肠杆菌和DH5α有什么区别？DH5α也是大肠杆菌的一种。。。
我们一般转化10B.

其实转化这个东西论坛里面有很多人都说过了，不过我还是再跟你说一遍吧，
转化没有长出来单克隆原因很多
1：你的感受态细胞活性如何？
2：你的质粒又是如何？有无抗性片段，是空质粒还是重组的？
3：质粒和感受态细胞的比例是否合适？
4：转化之后摇床上摇了多久？
赞一下(2人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-04-12 12:13:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
西瓜(金币+2): 鼓励交流 2011-04-12 18:13:54
最主要的原因：
先看你的的野生型大肠杆菌里面的自带的质粒和你要转的质粒是否兼容吧。
赞一下(2人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
3楼2011-04-12 17:15:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingyi0311

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-04-12 12:13:29:
我想知道你所说的大肠杆菌和DH5α有什么区别？DH5α也是大肠杆菌的一种。。。
我们一般转化10B.

其实转化这个东西论坛里面有很多人都说过了，不过我还是再跟你说一遍吧，
转化没有长出来单克隆原因很多
1： ...

恩，我弄的大肠杆菌是野生的，上面有荚膜，DH5a上面是没有荚膜的，我做对照的时候DH5a是能够转进去的，但是野生菌用同样的方法转不进去我的质粒，我的质粒是自己改造的
赞一下 回复此楼
4楼2011-04-13 15:51:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingyi0311

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-04-12 17:15:47:
最主要的原因：
先看你的的野生型大肠杆菌里面的自带的质粒和你要转的质粒是否兼容吧。

谢谢啊，我小提质粒没有提出来，明天准备大提质粒试试
赞一下 回复此楼
5楼2011-04-13 15:52:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dingyi0311 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭