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你跟我做的好像啊。。。“下游引物一样，上游引物只差一个碱基”。我在两个体系中也遇到过这样的问题，你可以提高退火温度或加DMSO看看，可能有些是非特异性条带。。。我原先以为做这个特异性很难保证，但现在看来特异性还是可以的，没有遇到什么非特异性条带（我现在已经合成一个体系了）
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