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xuqingchun33

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】pcr引物退火温度

各位大侠，小弟最近在做PCR,扩出的目的条带及其微弱，但杂带较亮。引物为以下
上游ATCCACGAGTACCATCATCTATGACTCCTTTAACTTTAG
下游GGCCTCGAGCCGTTAATTTTGTTTGATTTCAGCAT
请求帮助分析原因，并且求具体的退火温度，谢谢

[ Last edited by xuqingchun33 on 2011-4-7 at 21:47 ]

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1楼 2011-04-07 21:41:56

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睡着数绵羊

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by xuqingchun33 at 2011-04-07 21:41:56:
各位大侠，小弟最近在做PCR,扩出的目的条带及其微弱，但杂带较亮。引物为以下
上游ATCCACGAGTACCATCATCTATGACTCCTTTAACTTTAG
下游GGCCTCGAGCCGTTAATTTTGTTTGATTTCAGCAT
请求帮助分析原因，并且求具体的退火温度 ...

如果是做重叠PCR，那么你的这个是中间的重叠引物嘛，貌似没有设计好哦，这对引物该是完全互补这样好做写的。